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AN-RS-020

2020-06

Rilevamento di tracce di auramina O in polvere di curry

Protezione della sicurezza del consumatore con Misa


Riassunto

L'auramina O (AO) è un colorante industriale utilizzato per un'ampia gamma di prodotti, nonché come colorante fluorescente per il rilevamento di batteri acidoresistenti nei campioni clinici. Dato il suo colore giallo intenso, l'AO è apprezzato anche come additivo per migliorare l'aspetto di prodotti alimentari trattati in modo illecito. Il curry in polvere è un probabile bersaglio di tale adulterazione, poiché è una miscela giallo brillante di diverse spezie. I rischi per la salute associati all'ingestione e persino alla manipolazione impropria di AO includono un alto rischio di diversi tumori, tossicità neurale ed epatica e persino la morte. Nonostante i divieti di utilizzo dell'AO come additivo alimentare, i test di monitoraggio indicano che viene utilizzato sistematicamente come adulterante in alimenti e spezie.

Con l'impiego di Misa (Metrohm Instant SERS Analyzer) è possibile ottenere un rilevamento rapido e sensibile dell'AO nel curry in polvere in un formato di analisi semplice.


Configurazione


Introduzione

Misa è uno strumento versatile per il rilevamento rapido e accurato dei coloranti alimentari vietati. Questa Application Note descrive nel dettaglio una facile procedura di estrazione per rilevare l'AO nel curry in polvere adulterato.


Materiale di riferimento e creazione di librerie

Spettro di riferimento SERS standard di Auramine O.
Figure 1. Spettro di riferimento SERS standard di Auramine O.

Per stabilire uno spettro di riferimento per AO, è stato analizzato uno standard puro in acqua alcalina (100 μg/mL, pH 13) utilizzando nanoparticelle d'oro (Au NP). Lo spettro SERS unico mostrato in Figura 1 può essere utilizzato per creare una voce nella libreria per AO.


Analisi

https://s7e5a.scene7.com/is/image/metrohm/5163-Misa-samples-user?qlt=85&ts=1646660030093&dpr=off

In un test simulato per AO in polvere di curry, AO solido è stato mescolato con il curry in polvere acquistato per ottenere a intervallo di concentrazione dei campioni di prova addizionati: 1000, 100, 10, 5 e 1 μg/g. L'estrazione liquida di AO era eseguita aggiungendo 1 mL di 0,1 mol/L NaOH a 100 mg di campione in una fiala di vetro. Questo impasto è stato miscelato e lasciato riposare per 2 minuti. Acetato di etile (EA, 1 mL) e NaCl (100 mg) sono stati aggiunti alla fiala, che è stato poi leggermente capovolto alcune volte (non agitare energicamente) per promuovere l'estrazione di AO nello strato EA. Dopo 10 minuti, 50 μL di EA superiore lo strato è stato aggiunto a una fiala contenente 400 μL di Au NP e 50 μL di 0,5 mol/L NaCl. La fiala è stata agitata per mescolare e subito inserito nell'attacco del flaconcino su Misa per la misurazione.

Tabella 1. Parametri sperimentali
Strumento Acquisizione
Firmware 0.9.33 Potenza laser 5
Software Misa Cal V1.0.15 int. Ora 10 sec
Misa Fiala Allegato 6.07505.040 medie 10
Kit di identificazione - Au NP 6.07506.440 Raster SU

Risultati

Gli spettri SERS sovrapposti e corretti al basale di estratti basici di EA di curry in polvere addizionati con concentrazioni variabili di AO dimostrano un rilevamento affidabile fino a 1 μg/g (figura 2). Nota: i picchi negli spettri AO SERS mostrano variazioni relative al solvente e al pH.

Campo di rilevamento di AO con Misa e Au NP.
Figure 2. Campo di rilevamento di AO con Misa e Au NP.

Protocollo di prova sul campo

Rilevazione di auramina O sul campo

Usando l'estremità grande della paletta, aggiungi 3-4 misurini di campione in una fiala da 2 ml. Aggiungi la soluzione di NaOH alla fiala fino a metà. Aggiungi3-4 misurini di NaCl solido, quindi riempi la fiala verso l'alto con acetato di etile. Copri e inverti la fiala un paio di volte per mescolare, ma non agitare la fiala vigorosamente. Lascia riposare il campione per 5 minuti, appena si formeranno strati distinti. Riempi una fiala pulita a metà con Au NP. Usando le pipette, aggiungi 2 gocce ciascuna sullo strato superiore della soluzione campione e della soluzione di NaCl a Au NPs, tappa e agita delicatamente la fiala per mescolare. Inserisci nell'attacco della fiala su Misa per la misurazione.

Tabella 2. Requisiti per il protocollo di test sul campo
Kit ID - Au NP 6.07506.440
include: Nanoparticelle d'oro (Au NP)
Notizia in anticipo
Pipette monouso
Fiale di vetro da 2 ml
Reagenti  
Soluzione di NaOH 0,4 g NaOH in 100 ml di acqua
NaCl solido  
Acetato di etilene  
soluzione di NaCl 3 g di NaCl in 100 ml di acqua
Impostazioni di prova Utilizzo Kit ID OP su MISA

Conclusione

Il rilevamento facile e sensibile di AO nel curry in polvere adulterato è stato dimostrato utilizzando Misa. Questa analisi richiede una formazione minima dell'utente e consumabili minimi, il che la rende una piattaforma analitica ideale per i test di controllo qualità in loco negli impianti di produzione, spedizione e ricezione di alimenti. La portabilità e la facilità d'uso di Misa nel rilevamento di tracce di coloranti illeciti superano le complesse procedure di estrazione e analisi in un ambiente di laboratorio.

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Metrohm Italiana Srl

Via G. Di Vittorio, 5
21040 Origgio (VA)

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